自动进样器的维护及一些简单常见的故障的排除

更新时间：2012-06-02 点击次数：8920

自动进样器的维护及一些简单常见的故障的排除

HPLC分析仪器的普及和其在自动化程度的提高，自动进样模式取代了原来手动模式，它大大提高了工作效率，增强了分析的精度，消除了人为误差等等优势，越来越多的单位使用自动进样器。与此同时，自动进样器有时出现的故障往往会使人头疼。要弄清楚故障发生的原因，有效地解决它的故障，首先要从日常维护和保养着手。.

一、 自动进样器常规维护

        甲醇，乙腈，磷酸缓冲液是常用的流动相。用的是反相C18色谱柱。

1. 平时分析好样品，清洗好色谱柱后，用一根PEEK管连接在原先接色谱柱位置，用脱气的纯水以1.5mL/min流速清洗1.5小时，后用甲醇用同样条件清洗。自动进样器清洗液换上甲醇，打开排液阀，用针筒抽吸越50mL，再关闭排液阀，purge，rinse各三次，结束后按shift，9，关闭自动进样器。
纯水清洗色谱系统能清除管路中残存的缓冲盐，甲醇清洗，防止系统滋生细菌和微生物堵塞管路，也可以洗去不溶于水的物质。

2. 定期更换Septum  cutout，编号：228-36215-91 即Rinse口帽中的橡皮垫，分析样品设置自动进样中有洗针的程序，所以一段时间后橡皮垫很容易脏。及时更换避免垫上脏物污染针头。

3. 定期更换进样隔垫。编号228-33355-01。用固定扳手把进样口帽卸下，把里面的进样口衬筒sleeve取出，取下旧的进样垫，把新的原样装入，并原样装在进样口，用手把螺母拧紧，用扳手再拧约15°。

4. 用吸水纸插干净控制进样针的升降轴上的油污和垃圾，用少量润滑油涂于升降轴上，涂好之后用吸水纸吸去多余的润滑油。测试几个样品，听升降轴工作时声音清脆和声音有规律为佳。

5. 长期不用机器可以用纯甲醇代替清洗液，针筒抽吸约100mL清洗液，后purge 和rinse几次。
注：Rinse口螺帽和进样口衬筒及进样口螺帽若有盐析或附脏物，先用纯水，后异丙醇或甲醇放超声波超洗10分钟。洗去脏物后晾干装上。
当然在日常工作中必然会出现一些故障，这些故障一开始会使我们很焦急，使我们束手无策。但是当我们冷静下来，一点点排查原因，会发现其实有些问题很容易解决。诸如样品盘放的位置不准，进样时会出错，系统被停下来。只要放正样品盘，错误就会消失。工作中出现的小问题大都较容易解决，自己动手解决小故障，不仅能提高对仪器的进一步认识，而且还会有解决问题后的喜悦。以下是笔者曾经遇到的问题和解决方法，这里写出来与大家共同探讨。

二、自动进样器常见的故障和解决办法
1. 基线不稳，鬼峰增多
现象： Fig1 a 和Fig1 b分析的是同一标准品。Fig1 a基线不稳，鬼峰增多；而Fig1 b基线稳定，为正常图谱。
Fig1 a是基线不稳，鬼峰增多的图谱
Fig1 b是正常的图谱，同时是清洗干净后的图谱
      原因：在排除了泵，流动相和检测器问题后，这种现象说明进样系统被污染了。
        解决方法：用5%的高氯酸水溶液代替原来的自动进样器的清洗液，用针筒抽吸约100mL，在样品瓶中装入上述清洗液，用一根塑料阻尼管代替色谱柱，阻尼管出口处连废液，不接检测器。打开泵，设置一个常规流速。设置自动进样程序，进样量200μL，分析时间1分钟，连续20次。结束后把清洗液换成纯水，样品瓶中装纯水，依上述同样操作，（考虑到进样量较多，且重复次数多，准备5个装适量液体的样品瓶，放入样品盘中，设置自动进样程序，每个瓶连续抽4次，5个样品瓶合计抽20次，避免吸空）。
      说明： 5%的高氯酸水溶液能够有效地去除系统中的污垢，如若无高氯酸，可用甲醇，纯水大进样量多次清洗，也能起到同样的效果。


2. 泵压力突然降至0或很小
        现象：在一次连续分析样品过程中，开始分析时系统很正常，但是到分析第八个样品时突然发现泵压降至0.3Mpa，而正常时泵压为5.5Mpa。闻到进样器中有甲醇味（流动相中甲醇含量很大）。打开进样器门，发现排液阀下面的管子有液体滴出，带有甲醇味，停止系统，按shift+9发现进样口和rinse口盐析很厉害。
原因：进样口被堵，流动相无法进入色谱柱，渗漏出来，致使泵压下降。
解决方法：根据自动进样器常规维护
3.和4.操作，更换进样隔垫和Septumcutout（若没有备件，进样口密封圈和rinse口隔垫用纯水→甲醇超洗干净。）用擦镜纸沾纯水擦干净进样口和rinse口旁的盐析，再用甲醇擦洗。装上两个部件，打开机器调试，无渗漏，泵压正常即可。
       说明：笔者上一次做的实验是用较高浓度的磷酸缓冲盐做流动相，分析结束后用纯水，后用甲醇清洗系统。可能清洗的时间不够，后一次实验用的流动相甲醇比例又很高，所以残留在系统中的无机盐被析出，色谱系统被堵住，引起渗漏。故在用过了高浓度无机盐做流动相，分析结束后一定要先用纯水*洗净色谱系统，（大概用1ml/min流速洗2至3小时）再用甲醇*置换HPLC流路系统中的纯水，避免盐析。

3. 进样重现性不佳
原因：1）计量泵不准；
            2）六位阀磨损。
解决方法：1）计量泵吸液准确性判断。在样品瓶中装入足量的纯水，擦干净外面的水分，用分析天平称量，记录读数W1，放入进样盘，设置进样程序，进样量100μL，连续十次，结束后滤纸擦干样品瓶表面的水分，置天平称量，得读数W2，W1－W2得的数值应为1mL纯水在相应温度的质量。若差别不大，则计量泵无碍。若计量泵有问题，有可能计量泵柱塞杆或密封圈有问题。

2）六位阀磨损。根据自动进样器说明书，拆下六位阀，观察是否三个口有磨损，若磨损严重，则更换新的六位阀，根据书上的操作，装配好，调试，重现性良好即可。
       以上笔者举的例子都是平时工作中遇到的实例。对于自动进样器的维护保养和故障排除是一次次经验的积累。液相色谱的各个组件是互相的，如果一个部件有问题或被污染，被堵塞，可能会影响后面的部件，同时也要检查前面的部件是否有问题。比如基线不稳，要检查检测器是否被污染，检查流动相有没有问题，进样器是否脏了，色谱柱是否被污染，色谱柱是否没有稳定好，环境温度是否稳定等等。所以有时查问题比机器维修更难。这就要我们在工作中多多积累经验，多观察，多动脑筋。这才能熟悉您的机器，更好地用好机器。

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